Ce musée rassemble une des plus importantes collections d'art au monde, suivant le parcours de l'art italien du XIV au XX siècle.
C'est l'un des musées les plus importants d'Italie, avec la Galerie des Offices à Florence et les Musées du Vatican à Rome.
On y trouve notamment les œuvres de : Giovanni Bellini, Umberto Boccioni, Sandro Botticelli, Agnolo Bronzino, Caravage, Carlo Carrà, Piero della Francesca, Andrea Mantegna, Francesco Menzocchi, Amedeo Modigliani, Marco Palmezzano, Raphaël, Rubens, Tintoret, Alvise Vivarini, etc.
Dans la cour intérieure trône le « Napoléon » d'Antonio Canova, hommage au fondateur du musée inauguré en 1809.